3.母种分离方法有孢子弹射、组织分离和基质菌丝分离3种方法。这里主要介绍组织分离方法。组织分离方法:即切取各菇上小块组织移接于斜面培养基上,培养成母种。食用菌的子实体实际上就是双核菌丝的纽结物,它具有很强的再生能力。因此,只要切取一小块组织,把它接种到适宜的培养基上,适温培养,就能得到纯菌丝体。组织分离是把选好的种菇带入无菌室,在超净工作台上,用75%的酒精棉揩拭菌盖与菌柄,再用经火焰灭菌的解剖刀在菌柄的中部切开。使菇体形成对开。在菌盖和菌柄交界处或菌褶处,用接种刀切取一小块菇体,然后纵切成5毫米×10毫米的小薄片,用接种针挑取一块薄片,接入斜面培养基的中央,每支试管接种一小块薄片,待其萌发菌丝,即可得到母种。
4.适温培养将上述试管放入已消毒的培养箱或培养室内培养,温度控制在25℃左右,使分离获得的孢子或菌丝在适温下发育。组织分离接种后二三天,菌丝即萌发,并在培养基上蔓延生长;菇体分离接种后,一般情况下组织块先转为黑褐色,大约7天后组织培养块上长出白色绒毛状菌丝。
5.母种的提纯在菌丝萌发后,要认真观察,挑选色泽纯、健壮、长势正常和无间断的菌线,在无菌室超净工作台上连同培养基钩取菌丝,接人另备的试管培养基上。在23℃~25℃的恒温条件下,培养7天~10天,待菌丝长满试管后,再进行观察,从中择优取用,即为“母代”母种。
6.母种的转管培养将一支长满菌丝的试管在无菌操作下,分别转接到多只试管中培养。一般每支母种可扩接30支~50支,生产上供应的多为子代母种。它可以再次转管扩接。一般每支又可扩接成20支~25支子代母种,但转管次数不得超过4次。因转管代数过多易使菌种生活力降低。
7.出菇试验把母种接种于瓶装或袋装的木屑培养基上,根据各种菇的种性对温度的要求,进行适温培养,直至出菇才证实可用于生产。
二、原种繁殖培养
将母种接在瓶装或袋装的木屑培养基上,通过培养,即成原种。
三、栽培种扩大培育
将原种再次扩接在同样的木屑培养基上,在适温条件下培养30天~35天即为栽培种(又叫生产种),可用于生产栽培。
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2019-01-16 00:22:00