母液叼呐渲坪捅4妾一般预先配制成比所需浓度高10~100倍的母液,平时在冰箱里贮存,配制培养基时只需按比例量取即可。
以MS培养基为例,根据各种药品的特点,母液可分别配成6种(见表)
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│ │配制 │取量 │
├───┼───────────────┼───────────────┤
│母液1 │NHlNO3 82.5克 │50溶液配1升培养基时取20毫升 │
│ │KNO3 950克 │ │
│ │MgSO4. 7H2O 18. 5克 │ │
│ │加水定容到1000毫升 │ │
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│母液2 │CaCI2 22.0克 │100倍液配l升培养基时取10毫升 │
│ │加水定容到500毫升 │ │
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│母液3 │KH2PO4 8. 5克 │100倍液配1升培养基时取10毫升 │
│ │加水定容到500毫升 │ │
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│母液4 │Na2一EDTA 3.73克 │1DO倍液配1升培养基时取10毫升 │
│ │FeSO4· 7H2O 2.78克 │ │
│ │加水定容到1000毫升 │ │
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│母液5 │H3BO3 620毫克 │ │
│ │MnSO4· 4H2O 2230毫克 │100倍液配1升培养基时取10毫升 │
│ │ZnSO4· 7H2O 860毫克 │ │
│ │KL 83毫克 │ │
│ │Na2MoO4·ZH2O 12.5毫克 │ │
│ │CuSO4·5H2o 1.25毫克 │ │
│ │CoCl2·6H2O 1.25毫克 │ │
│ │加水定容到1000毫升 │ │
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│母液6 │肌醇5克 │100倍液配一升培养基时取10毫升 │
│ │甘氨酸 100毫克 │ │
│ │烟酸25毫克 │ │
│ │盐酸毗哆醇 25毫克 │ │
│ │盐酸流脓素 5毫克 │ │
│ │加水定容到 500毫升 │ │
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配制好的母液瓶上应分别贴上标签,注明母液号,配制倍数,日期及配1升母液时应取的量。配制好的母液可贮放在冰箱辆中备用(在低温下可保存几个月)。如发现有霉菌和沉淀就不能使用了。
配制培养基时要率先做好各种准备:首先是将母液按顺序排好,再是准备好所需要的各种玻璃器皿,称好所需的琼胀和蔗糖,配好所需的生长调节物质。
配制时先在量简或其他形式的容器内放入一定量的冰,以免加入药液时溅出或混合时浓度过高引起沉淀。再按母液顺序,按规定量量取.根据需要加入一定最的生长调节物质,最后加入琼脂和蔗糖,加完后例人锅内加热熔化。配好的培养基要用D.l~且当量的HCI(或NaOH)进行pH调整,一般保持5.1—6.0范围内。配制好的培养基要趁热分注,例入试管、三角瓶等培养器由中。
培养基配好后应及时进行高压灭菌,冷却凝结后可进行接种备用。
3、生长调节物质的使用
生长调节物质是培养基中的关键物质,对植物组织培养起着决定性的作用。
(1)、生长素有NAA(蔡乙酸)、IAA(吲哚乙酸)、IBA(吲哚丁酸)等。它对根的生长促进作用十分敏感,其次是对芽和茎的生长有促进作用。在组织培养的生根培养中是主要的促进物质。
(2)、细胞分裂素有BA(6一苯基嘌吟)、KT(激动素)、ZT(玉米素)等。它有促进细胞计裂、促进测芽生长的作用,它和少量生长素结合,常常来诱导芽的大量繁殖生长。
(3)、天然提取物.有些天然物质对植物的组织、细胞生长有促进生长的效应。(王怀宇)
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2018-05-02 08:12:00