(1)人工采卵 用专用的人工采卵箱完成。人工采卵箱的大小、摇蚊的生物密度与性比例、适宜的温度、湿度、照明和成虫的饵料等都是在人工采卵时必需考虑的条件。
①采卵箱 采卵箱的大小为1米×1米×2米,以4~5厘米的方杉木做箱架,外面挂有防蚊用的昆虫网,其上覆盖透明塑料布,以便保持箱内的湿度和从外面进行观察。
②摇蚊的个体密度与性比 采集摇蚊成虫或幼虫置人采卵箱。其个体密度是影响受精率的主要因素之一。在密度为2 000个/米。以上,可获80%以上的受精率。随着密度的增加,受精率也增加。当密度为4 000个/米。时,受精率达到90%。性比是生物学的重要条件之一,摇蚊雌雄同数量,或雄性稍多于雌性是最适条件。所以在采卵过程中,要注意补充雄性个体。
③温度 温度最适范围为23℃~25℃,当温度低于20℃或高于28℃时,受精率骤眸。温度低时可以通过人工加温来解决。一般是在采卵箱内放置2个40瓦的灯泡散热,并用定温继电器控制。
④湿度 适宜的空气相对湿度是雌雄摇蚊交尾的必要条件。相对湿度在90%以上,可得到80%~85%的受精率;相对湿度小于80%,受精率下降至zo%以下。调节湿度可由采卵箱中的喷水器控制,并由箱外塑料布防止蒸发。
⑤照明 研究结果表明,间歇照明的最佳条件是在24小时中,4次断续照明。每次关灯30分钟,每次放光为5.5小时的间歇照明,此时的受精率都在80%以上。在照明时开始产卵,照明2小时内产出的卵数为总产卵数的60%。
⑥饵料饵料置于采卵箱中的面盆,或喷洒在悬挂于采卵箱中的布幕上。成虫饵料为2%的蔗糖、2%的蜂蜜或两者混合液,都能获得较高受精率。
用以上采卵箱的条件,受精卵块持续的天数为12~15天,1天最高能得到400~750块卵块(平均100~120块)。假设1块卵块中的卵粒数平均为500个,则每天能采10万个个体,2周后可得到140万个个体,约合7千克幼虫。
(2)培养基
①琼脂培养基 将琼脂溶解于热水中,配成0.8%的琼脂溶液,冷却至50℃以后再加入牛奶。根据牛奶的添加量,增减蒸馏水的添加量,使琼脂浓度最后调整为0.75%。然后将培养基溶液25毫升倒入直径为90毫米的玻璃皿中冷却,使琼脂凝固,在上面加10毫升蒸馏水。
⑦黏土一牛奶培养基 取烧瓦用的黏土一定量,加入10倍重的蒸馏水,在大型研钵中研碎,使之成为分散的胶体状,除去砂质后,用117.68千帕的高压灭菌器灭菌30分钟,冷却之后取一定量,加入牛奶,迅速开始凝集,黏土粒子和牛奶一起形成块状的沉淀,即可用做幼虫的培养基。
⑧黏土一植物叶培养基 取杂草或桑叶或海产的大叶藻,加适量海砂和水,把植物叶子在研钵中磨碎,用50目筛绢网过滤挤出植物汁液,静置后取出植物汁液中的细砂。然后在黏土溶液中加入适量氯化钙,再加入植物汁液,就和牛奶一样发生凝集,直至上清液不着色、不浑浊时,等待10~20分钟后倾去上清液。加入蒸馏水进行振荡,再静置10~20分钟后,除去上清液,如此反复2~3次之后,将沉淀部分适当稀释便可用做培养基。
④下水沟泥培养基 从下水沟或养鱼塘采集鲜泥土,去掉其中的大块垃圾,加入等量的自来水搅拌,静置30分钟后倒掉上清液,这样反复进行1~2次,除去下水沟泥的悬浮物,用高压锅高压灭菌30分钟,冷却之后倾去上清液,加入适量蒸馏水即可当做培养基。
(3)培养方法
①接种 用人工采卵和人工培养基饲育的摇蚊幼虫,经60目筛网选出体长3~4毫米的幼虫于盆中,1~2天加入蒸馏水,再移人筛网用蒸馏水冲洗干净之后,把水分沥干,将幼虫接种在培养基上。
⑦静水培养法 上述4种培养基的共同特点是两相培养基,即培养基底是固体物质的黏土、牛奶、植物碎叶或下水沟泥的沉淀物,培养基的上部是水基蒸馏水。用直径90毫米的培养皿盛装培养基时,把大于3毫米的摇蚊幼虫接种于器皿中培养,这就是静水培养。这种静水培养可一直培养到化蛹前即可采收。它具有操作容易的优点。但是这种培养法由于得不到充足的氧气保证,培养基容易变质,产量远不如流水培养法。
⑧流水培养法 用33厘米×37厘米×7厘米的塑料容器或直径为45厘米的圆盆,在其底部放人厚度为10毫米的砂层,再在匕面铺上黏土一牛奶培养基,每3天添加1次,从一端注入微流水,另一端排出,再用孵化后24小时的幼虫进行流水培养。流水可以起到排污和增加氧气的作用,培养结果比静水培养的好。
④体长小于3毫米的幼虫培养体长小于3毫米的幼虫的口器发育尚未完成,对各种外界环境的抵抗力弱,更不可能抵抗0.1米/秒的流水速度,因此需要用另一种培养方法。这种方法是:在500毫升的三角烧瓶中,注入半瓶水,加进50毫升的培养基,将要孵化的卵块加进烧瓶里,用气泡石通气,每分钟通入800~1000厘米。的气体,温度以23℃~25℃为宜。这种条件下,卵块会顺利孵化,4天后体长可以达到3毫米,然后转入流水培养中继续培养。
①采卵箱 采卵箱的大小为1米×1米×2米,以4~5厘米的方杉木做箱架,外面挂有防蚊用的昆虫网,其上覆盖透明塑料布,以便保持箱内的湿度和从外面进行观察。
②摇蚊的个体密度与性比 采集摇蚊成虫或幼虫置人采卵箱。其个体密度是影响受精率的主要因素之一。在密度为2 000个/米。以上,可获80%以上的受精率。随着密度的增加,受精率也增加。当密度为4 000个/米。时,受精率达到90%。性比是生物学的重要条件之一,摇蚊雌雄同数量,或雄性稍多于雌性是最适条件。所以在采卵过程中,要注意补充雄性个体。
③温度 温度最适范围为23℃~25℃,当温度低于20℃或高于28℃时,受精率骤眸。温度低时可以通过人工加温来解决。一般是在采卵箱内放置2个40瓦的灯泡散热,并用定温继电器控制。
④湿度 适宜的空气相对湿度是雌雄摇蚊交尾的必要条件。相对湿度在90%以上,可得到80%~85%的受精率;相对湿度小于80%,受精率下降至zo%以下。调节湿度可由采卵箱中的喷水器控制,并由箱外塑料布防止蒸发。
⑤照明 研究结果表明,间歇照明的最佳条件是在24小时中,4次断续照明。每次关灯30分钟,每次放光为5.5小时的间歇照明,此时的受精率都在80%以上。在照明时开始产卵,照明2小时内产出的卵数为总产卵数的60%。
⑥饵料饵料置于采卵箱中的面盆,或喷洒在悬挂于采卵箱中的布幕上。成虫饵料为2%的蔗糖、2%的蜂蜜或两者混合液,都能获得较高受精率。
用以上采卵箱的条件,受精卵块持续的天数为12~15天,1天最高能得到400~750块卵块(平均100~120块)。假设1块卵块中的卵粒数平均为500个,则每天能采10万个个体,2周后可得到140万个个体,约合7千克幼虫。
(2)培养基
①琼脂培养基 将琼脂溶解于热水中,配成0.8%的琼脂溶液,冷却至50℃以后再加入牛奶。根据牛奶的添加量,增减蒸馏水的添加量,使琼脂浓度最后调整为0.75%。然后将培养基溶液25毫升倒入直径为90毫米的玻璃皿中冷却,使琼脂凝固,在上面加10毫升蒸馏水。
⑦黏土一牛奶培养基 取烧瓦用的黏土一定量,加入10倍重的蒸馏水,在大型研钵中研碎,使之成为分散的胶体状,除去砂质后,用117.68千帕的高压灭菌器灭菌30分钟,冷却之后取一定量,加入牛奶,迅速开始凝集,黏土粒子和牛奶一起形成块状的沉淀,即可用做幼虫的培养基。
⑧黏土一植物叶培养基 取杂草或桑叶或海产的大叶藻,加适量海砂和水,把植物叶子在研钵中磨碎,用50目筛绢网过滤挤出植物汁液,静置后取出植物汁液中的细砂。然后在黏土溶液中加入适量氯化钙,再加入植物汁液,就和牛奶一样发生凝集,直至上清液不着色、不浑浊时,等待10~20分钟后倾去上清液。加入蒸馏水进行振荡,再静置10~20分钟后,除去上清液,如此反复2~3次之后,将沉淀部分适当稀释便可用做培养基。
④下水沟泥培养基 从下水沟或养鱼塘采集鲜泥土,去掉其中的大块垃圾,加入等量的自来水搅拌,静置30分钟后倒掉上清液,这样反复进行1~2次,除去下水沟泥的悬浮物,用高压锅高压灭菌30分钟,冷却之后倾去上清液,加入适量蒸馏水即可当做培养基。
(3)培养方法
①接种 用人工采卵和人工培养基饲育的摇蚊幼虫,经60目筛网选出体长3~4毫米的幼虫于盆中,1~2天加入蒸馏水,再移人筛网用蒸馏水冲洗干净之后,把水分沥干,将幼虫接种在培养基上。
⑦静水培养法 上述4种培养基的共同特点是两相培养基,即培养基底是固体物质的黏土、牛奶、植物碎叶或下水沟泥的沉淀物,培养基的上部是水基蒸馏水。用直径90毫米的培养皿盛装培养基时,把大于3毫米的摇蚊幼虫接种于器皿中培养,这就是静水培养。这种静水培养可一直培养到化蛹前即可采收。它具有操作容易的优点。但是这种培养法由于得不到充足的氧气保证,培养基容易变质,产量远不如流水培养法。
⑧流水培养法 用33厘米×37厘米×7厘米的塑料容器或直径为45厘米的圆盆,在其底部放人厚度为10毫米的砂层,再在匕面铺上黏土一牛奶培养基,每3天添加1次,从一端注入微流水,另一端排出,再用孵化后24小时的幼虫进行流水培养。流水可以起到排污和增加氧气的作用,培养结果比静水培养的好。
④体长小于3毫米的幼虫培养体长小于3毫米的幼虫的口器发育尚未完成,对各种外界环境的抵抗力弱,更不可能抵抗0.1米/秒的流水速度,因此需要用另一种培养方法。这种方法是:在500毫升的三角烧瓶中,注入半瓶水,加进50毫升的培养基,将要孵化的卵块加进烧瓶里,用气泡石通气,每分钟通入800~1000厘米。的气体,温度以23℃~25℃为宜。这种条件下,卵块会顺利孵化,4天后体长可以达到3毫米,然后转入流水培养中继续培养。
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2018-07-23 23:45:00